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粗蛋白測(cè)定儀是測(cè)定小麥蛋白質(zhì)的儀器之一

來源: http://www.yangzhuc.com/  類別:技術(shù)文章  更新時(shí)間:2014-08-08  閱讀
  作為重要的農(nóng)作物之一的小麥,其經(jīng)濟(jì)價(jià)值受品質(zhì)差異的影響很大。而衡量小麥加工品質(zhì)的重要指標(biāo)之一是蛋白質(zhì)的含量,對(duì)其測(cè)定一般可以采用準(zhǔn)確度和精密度極高的凱氏定氮法,但是這種方法費(fèi)工費(fèi)時(shí),而且實(shí)驗(yàn)品強(qiáng)酸強(qiáng)堿也對(duì)環(huán)境有很嚴(yán)重的影響。用凱氏定氮法、近紅外光譜分析法、考馬斯亮藍(lán)染色法測(cè)定小麥籽粒蛋白質(zhì)含量,以比較它們的測(cè)量準(zhǔn)確性,確定各自的適用時(shí)間和范圍,探索小麥育種早期材料品質(zhì)測(cè)定的有效方法。凱氏定氮法的儀器可以采用粗蛋白測(cè)定儀,這是一款在此原理基礎(chǔ)上研發(fā)出來的。
  
  3種方法都能測(cè)定出全部材料蛋白質(zhì)含量。粗蛋白測(cè)定儀凱氏定氮法和近紅外光譜分析法在95%置信區(qū)間顯著性系數(shù)都小于0.05,這說明這兩種方法與常年平均值之間存在線性關(guān)系。凱氏定氮法和近紅外光譜分析法在T檢驗(yàn)結(jié)果中,顯著性概率大于0.05,這說明這兩種方法測(cè)定的蛋白質(zhì)含量與常年平均值之間不存在顯著差異,可以很好的顯示被測(cè)樣品的蛋白質(zhì)水平。試驗(yàn)結(jié)果中,考馬斯亮藍(lán)染色法測(cè)定值與常年平均值之間相關(guān)性不強(qiáng),這可能是操作誤差引起的,通過試驗(yàn)表明,該方法只有在有微量蛋白時(shí)測(cè)定結(jié)果才準(zhǔn)確。
  
  粗蛋白測(cè)定儀凱氏定氮法測(cè)試結(jié)果準(zhǔn)確,但試驗(yàn)所需儀器多為特制的玻璃儀器,易于破損,蒸餾與吸收裝置復(fù)雜,不便于操作,試驗(yàn)過程所需時(shí)間較長(zhǎng),一般需要7}8h,操作繁瑣,能源、試劑消耗量大,并且在消化時(shí)放出大量有毒氣體,特別是測(cè)試過程中需要研磨材料,對(duì)育種初期較珍貴樣品品質(zhì)的測(cè)定,該方法不適用。
  
  DA7200近紅外光譜分析速度快,一次只需10}20min,分析效率高,適用的樣品范圍廣,樣品不需要預(yù)處理、用量也較小,3040種子即可用于分析,分析成本低,測(cè)試重現(xiàn)性好,對(duì)樣品無損傷,在育種早代用來鑒定、篩選大量中間材料是非常經(jīng)濟(jì)有效的。考馬斯亮藍(lán)染色法快速、靈敏,但只有在微量蛋白的測(cè)定時(shí)結(jié)果才準(zhǔn)確,因此在試驗(yàn)前應(yīng)將樣品稀釋至蛋白濃度為0.1}1m}/ml,而且試驗(yàn)必須在1h內(nèi)完成,不然測(cè)試結(jié)果不準(zhǔn)確[mo。
  
  通過試驗(yàn),對(duì)三種方法的原理都有一定的了解,對(duì)粗蛋白測(cè)定儀的應(yīng)用原理也有更加深刻的研究,這對(duì)蛋白質(zhì)的測(cè)定有了很好的指導(dǎo)作用,對(duì)在實(shí)際工作中選擇適宜的分析方法具有重要的指導(dǎo)意義。
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