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種子DNA提取儀用于大麥干種子的性狀檢測

來源: http://www.yangzhuc.com  類別:技術文章  更新時間:2014-11-22  閱讀
      不管是在農業(yè)還是林業(yè)中對于種子植物的研究中植物的遺傳特性研究是一個重要的課題,自然遺傳性質的研究離不開種子DNA提取儀對DNA的提取進行排列和成分組成的差異。植物中的DNA的提取基本上采用的是植物組織特別是葉片中的,也真因如此種子中的研究變得越來越受到學者的重視。種子DNA提取儀器法提取大麥種子中的DNA可以為提取提供一定的參考依據。
  
       種子DNA提取儀從干種子中提取的DNA用濃度1%瓊脂糖電泳檢測,DNA是完整的,而且RNA基本無殘留,說明干種子用該方法提取DNA的效果好。試驗用無胚的半粒大麥種子提取DNA,通過與葉片中提取的DNA比較,結果顯示,從干種子中提取DNA與葉片中提取的片段大小相同,因此,從大麥干種子中提取DNA是可靠的。此外,還可用有胚的半粒種子用于形態(tài)學觀察,既對DNA進行了檢測,又對大麥的表型性狀進行了檢測。
  
       將材料除去種皮,并將種子從中間橫向切開。如需要繼續(xù)使用有胚乳的部分進行形態(tài)學觀察,則切種子的時不能損傷胚乳。將去皮的不含胚的半粒種子(30~50mg)用鉗子夾碎放入2.0ml離心管中,加入液氮,用電鉆(玻璃鉆頭)迅速研磨成白色粉狀(由于樣品量小,不能放在研缽中研磨,否則不能完全收集),進行操作或置于-80℃中用于種子DNA提取儀的提取備用。
  
       通過種子DNA提取儀的樣品提取研究分析大麥干種子中的蛋白質、糖及RNA含量較高,如果大分子等物質去除不完全,則DNA被這些大分子物質包裹,很難溶于TE中,對后續(xù)的研究影響很大。因此,在試驗中,沉淀DAN時,選加入濃度3mol/L醋酸鈉混勻之后再加入異丙醇,這樣,雖然DNA稍有損失,但提純效果好。  
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